本研究旨在確定全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的報(bào)陽(yáng)時(shí)間(TTP)和生長(zhǎng)曲線(GDPG)是否可用于評(píng)估菌血癥患者的細(xì)菌載量及其與疾病嚴(yán)重程度的潛在關(guān)聯(lián)。將已知的細(xì)菌菌懸液注入血培養(yǎng)瓶中,從臨床分離到的30株金黃色葡萄球菌和30株大腸桿菌用于本實(shí)驗(yàn)。下載所有菌株的GDPGs并繪圖。通過比較GDPG與“標(biāo)準(zhǔn)”曲線確定細(xì)菌載量。在3個(gè)細(xì)菌載量類別(<100、100~1000、>1000 CFU/mL)中比較與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)的變量。結(jié)果顯示,相較于大腸桿菌,金黃色葡萄球菌對(duì)血容量更為敏感。若樣本被延遲12小時(shí)送至微生物實(shí)驗(yàn)室會(huì)導(dǎo)致TTP降低2~3小時(shí)。>1000 CFU/mL的金黃色葡萄球菌和500~1000 CFU/mL的大腸桿菌的TTP平均值分別為15h和10 h。對(duì)于金黃色葡萄球菌,細(xì)菌載量>100 CFU/mL的患者死亡率較高(死亡OR=9.7,95%CI 1.6~59,p=0.01)。而對(duì)于大腸桿菌菌血癥,并未發(fā)現(xiàn)任何與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)的變量??傊?,全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的GDPG可用于預(yù)估細(xì)菌載量,且金黃色葡萄球菌的細(xì)菌載量與臨床預(yù)后相關(guān),相反,大腸桿菌的細(xì)菌載量與臨床預(yù)后無關(guān)。


前言


血培養(yǎng)仍然是診斷敗血癥和菌血癥的金標(biāo)準(zhǔn),細(xì)菌的種類、敏感性和感染部位對(duì)臨床治療至關(guān)重要。此外,研究顯示細(xì)菌載量可能與疾病嚴(yán)重程度及患者預(yù)后休戚相關(guān),可通過報(bào)陽(yáng)時(shí)間(TTP)來間接估計(jì)細(xì)菌載量。細(xì)菌產(chǎn)生的CO2與血培養(yǎng)瓶中傳感器監(jiān)測(cè)到的信號(hào)成比例,一旦系統(tǒng)檢測(cè)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期就會(huì)產(chǎn)生“陽(yáng)性”信號(hào)。同時(shí),自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)形成的細(xì)菌生長(zhǎng)曲線圖(GDPG)或許可用于評(píng)估患者血液中的初始細(xì)菌載量。本研究的目的是探索TTP和GDPG是否可用于檢測(cè)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌菌血癥以及細(xì)菌載量與疾病嚴(yán)重程度是否存在相關(guān)性。


研究?jī)?nèi)容01


報(bào)陽(yáng)時(shí)間與細(xì)菌載量細(xì)菌載量與報(bào)陽(yáng)時(shí)間直接相關(guān)。大腸桿菌傳代一次的時(shí)間為18~24 min,而金黃色葡萄球菌為1~1.2 h。


表1金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的細(xì)菌載量與報(bào)陽(yáng)時(shí)間的相關(guān)性表2不同細(xì)菌載量的金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的傳代時(shí)間02

臨床血培養(yǎng)的技術(shù)特點(diǎn)金黃色葡萄球菌的TTP與血容量顯著相關(guān)。當(dāng)細(xì)菌載量在50~500 CFU/mL之間時(shí),延遲12 h培養(yǎng),大腸桿菌的平均TTP縮短3.6±0.5 h,金黃色葡萄球菌的平均TTP縮短2.2±0.7 h。

表3血培養(yǎng)陽(yáng)性特征


細(xì)菌載量與臨床預(yù)后的相關(guān)性金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的平均TTP分別為15 h和10 h,對(duì)應(yīng)的預(yù)估細(xì)菌載量分別為>1000 CFU/mL和500~1000 CFU/mL。金黃色葡萄球菌菌血癥更為嚴(yán)重,患者住院時(shí)間長(zhǎng)、用藥更頻繁、疾病嚴(yán)重程度評(píng)分更高。圖1 30例臨床血培養(yǎng)TTP柱狀圖(A)金黃色葡萄球菌;(B)大腸桿菌

表4菌血癥患者臨床特征

本文進(jìn)一步比較了3種細(xì)菌載量的臨床預(yù)后。對(duì)于金黃色葡萄球菌菌血癥,細(xì)菌載量在100~1000 CFU/mL時(shí)患者死亡率顯著增加。而大腸桿菌無顯著變化。

圖2金黃色葡萄球菌菌血癥患者死亡數(shù)、需重癥監(jiān)護(hù)、需血管升壓藥及機(jī)械通氣的四分位數(shù)


總結(jié)


本研究表明TTP與初始接種物直接相關(guān),細(xì)菌生長(zhǎng)曲線受生長(zhǎng)速率和初始細(xì)菌載量的影響。金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)對(duì)所獲得的血容量敏感,此外,樣本轉(zhuǎn)移至微生物實(shí)驗(yàn)室延遲12小時(shí)便會(huì)導(dǎo)致TTP降低2~3h,這些結(jié)果表明采集一整套培養(yǎng)瓶的重要性,且要保證采夠足量的體積并要迅速轉(zhuǎn)移處理培養(yǎng)瓶。盡管大腸桿菌的生長(zhǎng)速率更快,但金黃色葡萄球菌的感染更為嚴(yán)重,患者死亡率更高,可能菌血癥的嚴(yán)重程度不僅與細(xì)菌載量有關(guān),還與細(xì)菌毒素相關(guān),如內(nèi)毒素、磷壁酸、肽聚糖和細(xì)菌DNA等。


總之,從自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)中下載的GDPG可用于估計(jì)菌血癥患者的初始細(xì)菌載量。金黃色葡萄球菌的細(xì)菌載量與較差的臨床預(yù)后相關(guān)?;诮瘘S色葡萄球菌和大腸桿菌生長(zhǎng)的差異特征,未來會(huì)繼續(xù)深入探索自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)中的生長(zhǎng)曲線,以便根據(jù)生長(zhǎng)曲線的形狀快速識(shí)別出細(xì)菌種類。


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