2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
2.1耐鹽菌生理生化性質(zhì)
菌株NM-1為長(zhǎng)桿狀，革蘭氏陰性，在耐鹽堿分離培養(yǎng)基上，菌落呈圓形、濕潤(rùn)、光滑，菌落為黃色，可利用葡萄糖、乳糖和蔗糖，氧化酶以及過氧化氫酶陽性，理化性質(zhì)見表1.
表1菌株NM-1生理生化性質(zhì)
注：“+”為陽性；“~”為陰性
2.2不同pH對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響
在不同pH（8.0、9.0、10.0、11.0、12.0）條件下，利用耐鹽菌富集培養(yǎng)基對(duì)菌株NM-1進(jìn)行培養(yǎng)，每隔24 h測(cè)定培養(yǎng)液吸光度，繪制成時(shí)間~吸光度曲線，結(jié)果如圖1所示。
由圖1可以看出，在pH為8.0、9.0和10.0條件下，菌株NM-1的最大吸光度接近，分別為0.76、0.74和0.64,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于pH為11.0和12.0條件下的吸光度，因此，菌株NM-1的最適pH生長(zhǎng)范圍為8.0——10.0.
2.3不同NaCl濃度對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響
將菌株NM-1在含有10%、30%和50%NaCl的富集培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每隔24 h測(cè)定其吸光度OD560,繪制生長(zhǎng)曲線如圖2所示。
由圖2可以看出，菌株NM-1在NaCl濃度為10%和30%條件下，均在培養(yǎng)4 d時(shí)吸光度達(dá)到最大值，分別為0.98和0.96.而4 d后，菌株NM-1在NaCl濃度為30%條件下的吸光度明顯下降至0.75.而在NaCl濃度為50%的培養(yǎng)條件下，菌株NM-1的生長(zhǎng)停滯期明顯延長(zhǎng)，吸光度變化很小，且培養(yǎng)3 d時(shí)出現(xiàn)最大吸光度。因此，該菌株最大耐受NaCl的濃度為30%,為中度嗜鹽微生物。
2.4不同Na2CO3濃度對(duì)菌的生長(zhǎng)的影響
分別配制含有0.2、0.25、0.3 M Na2CO3的富集培養(yǎng)基，將菌株NM-1在30℃條件下振蕩培養(yǎng)，每24 h測(cè)定培養(yǎng)液吸光度，繪制生長(zhǎng)曲線如圖3所示。
由圖3可以看出，菌株NM-1在Na2CO3濃度為0.25 M條件下，吸光度最大，均高于0.2 M和0.3 M條件下的吸光度，而在0.3 M Na2CO3濃度下，吸光度最小，且基本沒有變化，因此，菌株NM-1生長(zhǎng)的最適Na2CO3濃度為0.25 M.
2.5細(xì)菌系統(tǒng)發(fā)育樹
菌株NM-116S r RNA序列長(zhǎng)度為1415 bp.將序列進(jìn)行BLASTn比對(duì)及利用CustalX2.1和Mega5軟件構(gòu)建系統(tǒng)樹，如圖4所示。
由圖4可以看出，菌株NM-116S r RNA序列與Halomonasvariabilisstrain SL121（JN645866）以及HalomonasvariabilisstrainHTG7（AY204638）序列的相似度最高，均為98%,且三者同在一個(gè)分支上，結(jié)合菌株NM-1所處的系統(tǒng)樹位置，初步判定菌株NM-1應(yīng)為鹽單胞菌屬（Halomonassp.）。
3結(jié)束語
鹽單胞菌屬（Halomonas）屬于鹽單胞菌科，為革蘭氏陰性、好氣桿菌，能在鹽度為0%——32%（w/v）條件下生長(zhǎng)。作者從黃河三角洲鹽堿地土壤中分離到一株耐鹽堿菌株NM-1.該菌株生長(zhǎng)最適pH范圍為8.0——10.0,最大耐受NaCl的濃度為30%,為中度嗜鹽微生物，生長(zhǎng)的最適Na2CO3濃度為0.25 M.該菌株形態(tài)特征及生理生化性質(zhì)與耐鹽單胞菌屬基本一致，與鹽單胞菌屬的幾個(gè)相近種相同的特征有：革蘭氏陰性，氧化酶、過氧化氫酶陽性，具反硝化作用，淀粉水解陰性。結(jié)合菌株16S rDNA序列相似度以及系統(tǒng)分類學(xué)位置，基本判定菌株NM-1屬于耐鹽單胞菌屬（Halomonassp.），建議命名為Halomonassp.NM-1（AB917466）。
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