3討論
3.1類腸膜魏斯氏菌對豬生長性能的影響
腸道菌群與機體的生長和代謝密切相關(guān)。故生產(chǎn)和科研工作中通過添加益生菌來改善生長和免疫等，如植物乳桿菌可通過N-乙?；劝滨０反龠M(jìn)果蠅的生長。王蕾在AA肉雞飼糧中添加類腸膜魏斯氏菌后，提高了試驗雞的生長性能。復(fù)合乳酸菌]和魏斯氏菌均能顯著提高生長豬的生長性能。張陽等在生長育肥豬飼糧中添加復(fù)合益生菌(益生菌數(shù)量在105CFU/g以上)，生長性能有提高趨勢，但差異不顯著。楊立杰等在生長育肥豬飼糧中添加植物乳桿菌等復(fù)合菌發(fā)酵的發(fā)酵飼料(益生菌數(shù)量在108CFU/g以上)，發(fā)現(xiàn)其生長性能有提高趨勢。本研究中，菌體添加量(107CFU/g)介于上述研究劑量之間，是參考其他學(xué)者和前期研究結(jié)果，綜合實際生產(chǎn)效果設(shè)定的，益生菌的添加量并非越多越好。本研究采用育肥后期豬作為研究對象，發(fā)現(xiàn)其生長性能較對照組提高，但差異均不顯著，這與部分學(xué)者研究結(jié)果一致，可能與試驗動物選擇育肥期、試驗期較短、添加量不同等因素相關(guān)，還需后續(xù)進(jìn)一步深入研究。
飼糧中添加類腸膜魏斯氏菌后，顯著提高了糞便中產(chǎn)短鏈脂肪酸菌的相對豐度(梭菌目等)和脂肪酸及其衍生物(2-羥基十六烷酸、Avocadene acetate和2-羥基十四烷酸)的差異表達(dá)倍數(shù)。十六烷酸可通過激活腦血管生成因子1(BAI1)受體調(diào)節(jié)先天性免疫應(yīng)答，Avocadene屬于脂肪醇，其通過提高機體葡萄糖氧化和降低線粒體中的活性氧，改善葡萄糖利用率，提高胰島素敏感性，進(jìn)而影響采食。由此提示，添加類腸膜魏斯氏菌或具有潛在提高育肥后期豬生長性能的趨勢，還有待進(jìn)一步的證實。
3.2類腸膜魏斯氏菌對豬糞便中菌群的影響
腸道菌群與宿主體內(nèi)營養(yǎng)代謝、免疫、健康與疾病息息相關(guān)。本研究采用剛排泄的糞便作為研究樣品，采樣過程避開屠宰和綁定后直腸采樣帶來的應(yīng)激，更能真實地反映腸道菌群結(jié)構(gòu)，并且有利于減少試驗經(jīng)費開支和進(jìn)行長期跟蹤試驗，有利于開展科學(xué)研究工作，故而，越來越多的學(xué)者通過研究糞菌來關(guān)注腸道微生物。
在哺乳動物腸道中，厚壁菌門和擬桿菌門約占腸道菌群的90%以上，是最主要的優(yōu)勢菌群。腸道菌群多樣性與擬桿菌門/厚壁菌門的比值呈非線性的強相關(guān)性；厚壁菌門/擬桿菌門比值與機體內(nèi)脂肪的沉積呈正相關(guān)性，且與脂質(zhì)代謝有互作作用；飼糧中添加大豆多糖和益生菌等能降低糞菌中厚壁菌門/擬桿菌門比值，高血壓、輻射、脂肪肝的腸道內(nèi)擬桿菌門/厚壁菌門比值則顯著提高。梭菌科通過抑制參與脂質(zhì)吸收的受體CD36的表達(dá)，調(diào)節(jié)宿主的脂質(zhì)吸收能力。克里斯滕森菌科的相對豐度與炎癥等代謝疾病呈顯著負(fù)相關(guān)，如代謝綜合征等，是動物腸道和腸黏膜中廣泛存在的一種菌，宿主基因(如FUT2基因)影響克里斯滕森菌科的相對豐度(30%～60%的相對豐度差異)，其在腸道內(nèi)產(chǎn)生氫氣作為史氏甲烷短桿菌產(chǎn)甲烷的底物，實現(xiàn)二者在腸道內(nèi)的共生，共同促進(jìn)健康作用。類腸膜魏斯氏菌具有增強腸道黏蛋白-2(MUC-2)的表達(dá)、促進(jìn)腸上皮再生、提高血清中白蛋白含量等作用。本研究發(fā)現(xiàn)，添加類腸膜魏斯氏菌后，糞菌中厚壁菌門/擬桿菌門的比值提高，克里斯滕森菌科R-7群相對豐度提高，但差異均不顯著，狹義梭菌屬_1相對豐度顯著上升，提示飼糧中添加類腸膜魏斯氏菌可能影響脂質(zhì)的沉積，其與脂肪沉積和菌群多樣性之間的關(guān)系還待進(jìn)一步研究。
密螺旋體屬是哺乳動物腸道內(nèi)常見菌，其相對豐度與消化道內(nèi)植源性食物中的復(fù)雜糖類密切相關(guān)，添加類腸膜魏斯氏菌后，糞菌中密螺旋體屬_2的相對豐度極顯著升高，提示添加類腸膜魏斯氏菌可能具有提高豬消化道對復(fù)雜糖類的消化能力，有助于提高地方豬對牧草的消化利用率。
短鏈脂肪酸在腸道內(nèi)發(fā)揮清除致病菌、抗炎、提高免疫和調(diào)控基因表達(dá)等作用，在骨骼肌和肝臟的生理活動中發(fā)揮作用，其通過腸肝軸，降低炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)免疫功能和糖脂代謝，通過抑制組蛋白去乙?；?HDAC)的活性，上調(diào)B10細(xì)胞數(shù)量，實現(xiàn)免疫平衡。短鏈脂肪酸還是肥胖性脂肪肝的潛在治療靶點，產(chǎn)生的質(zhì)子降低細(xì)胞內(nèi)pH和質(zhì)子動力勢(PMF)，降低毒力基因T3SS-1表達(dá)水平。短鏈脂肪酸主要由腸道菌群(如擬桿菌屬、梭菌屬和糞桿菌屬等)對腸道內(nèi)物質(zhì)(如益生元等)進(jìn)行發(fā)酵而獲得。本研究發(fā)現(xiàn)，添加類腸膜魏斯氏菌后，顯著提高了狹義梭菌屬_1和理研菌科的相對豐度，對抵抗炎癥、維持機體免疫平衡具有潛在促進(jìn)作用。
3.3類腸膜魏斯氏菌對豬糞便中代謝產(chǎn)物的影響
腸道微生物處于動態(tài)平衡中，微生物結(jié)構(gòu)及相對豐度的差異性導(dǎo)致代謝產(chǎn)物也具有差異性。本研究顯示，飼糧添加類腸膜魏斯氏菌后，提高了糞便中2-羥基十六烷酸、磷酸脫氧腺苷、2-羥基十四烷酸和Avocadene acetate等物質(zhì)的差異表達(dá)倍數(shù)，降低了Corchorifatty acid F和2,3-丁炔前列腺素E1的差異表達(dá)倍數(shù)，其中2-羥基十六烷酸、Avocadene acetate和2-羥基十四烷酸是脂肪酸及其衍生物，說明添加類腸膜魏斯氏菌后，或具有潛在改變機體脂肪代謝的趨勢。
前列腺素可通過腸平滑肌細(xì)胞中的前列腺素E受體信號通路引起結(jié)腸收縮，從而改變食糜在腸道中停留的時間，或?qū)ε疟銜r間具有一定的調(diào)節(jié)作用，進(jìn)而影響消化吸收。Avocadene通過改善葡萄糖利用率以及胰島素敏感性，進(jìn)而影響采食，本試驗中，添加類腸膜魏斯氏菌后，平均日采食量和平均日增重提高，料重比降低，但差異均不顯著。添加類腸膜魏斯氏菌后是否能通過2,3-丁炔前列腺素E1和Avocadene acetate間接影響飼糧的消化吸收，進(jìn)而提高生長性能，還待進(jìn)一步研究。
4結(jié)論
飼糧中添加類腸膜魏斯氏菌(107CFU/g)，改變豬糞中主要菌群的結(jié)構(gòu)和部分代謝產(chǎn)物差異表達(dá)倍數(shù)；提高短鏈脂肪酸產(chǎn)生菌的相對豐度，提高脂肪酸類物質(zhì)的差異表達(dá)倍數(shù)，說明類腸膜魏斯氏菌具有提高與脂肪代謝相關(guān)菌和代謝產(chǎn)物的益生功能。
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