釀酒酵母細胞cdc50基因缺失會抑制細胞生長,改變細胞形態(tài)。利用RNA-seq轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)對野生型酵母菌株BY4742和突變菌株Δcdc50進行比較分析后表明,兩組差異表達基因共有581個,其中cdc50基因敲除后上調(diào)基因有271個,下調(diào)基因有310個。GO功能分析表明,差異表達基因主要富集在生物學過程中的氧化還原過程等,分子功能中的氧化還原酶活性、輔助因子結(jié)合和跨膜轉(zhuǎn)運體活性等。KEGG富集分析表明,差異表達基因主要富集在糖酵解/糖異生、脂肪酸降解和碳代謝通路等。本研究為揭示cdc50基因的生物學作用和相關(guān)分子機制的提供了理論基礎(chǔ)。


細胞形態(tài)和生長情況


挑取適量對數(shù)期突變菌株Δcdc50和野生型釀酒酵母BY4742細胞,接種到對應(yīng)的YPD液體培養(yǎng)基中,保證初始樣本OD600nm值相同,置于搖床中180 r/min、30℃培養(yǎng),每隔2 h取適量培養(yǎng)液測其OD600nm值,繪制生長曲線,24 h后取少量菌株BY4742和Δcdc50細胞菌液于載玻片上在顯微鏡下觀察其形態(tài)。


細胞生長和形態(tài)測定


以培養(yǎng)24 h的野生型BY4742細胞的OD600nm值為對照,分別測量突變菌株Δcdc50在不同時間點的OD600nm值,計算相對生長率,結(jié)果見圖1A。

圖1野生型釀酒酵母菌株BY4742和突變菌株Δcdc50的相對生長率(A)和細胞形態(tài)(B)



由圖1A可知,培養(yǎng)2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h的突變菌株Δcdc50的相對生長率較野生型酵母BY4742菌株降低,均具有顯著差異(P<0.05),其中培養(yǎng)12 h后,野生型BY4742菌株培養(yǎng)的相對生長率為2.10%,突變菌株Δcdc50為1.98%。菌株BY4742和Δcdc50細胞形態(tài)見圖1B。由圖1B可知,顯微鏡下也顯示突變菌株Δcdc50細胞形態(tài)與野生型BY4742對比發(fā)生了明顯的改變。野生型BY4742釀酒酵母細胞為卵圓形,細胞壁完整,邊緣清晰;突變菌株Δcdc50細胞多為長桿狀,其邊緣較為模糊。


結(jié)論


釀酒酵母細胞cdc50基因缺失會抑制細胞生長,改變細胞形態(tài)。利用RNA-seq轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)對野生型酵母菌株BY4742和突變菌株Δcdc50進行比較分析后表明,兩組差異表達基因共有581個,其中cdc50基因敲除后上調(diào)基因有271個,下調(diào)基因有310個。GO功能分析表明,差異表達基因主要富集在生物學過程中的氧化還原過程等,分子功能中的氧化還原酶活性、輔助因子結(jié)合和跨膜轉(zhuǎn)運體活性等。KEGG富集分析表明,差異表達基因主要富集在糖酵解/糖異生、脂肪酸降解和碳代謝通路等。本研究為揭示cdc50基因的生物學作用和相關(guān)分子機制的提供了理論基礎(chǔ)。


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