掌握細(xì)菌的生長規(guī)律，可以有目的地研究和控制致病菌的生長，發(fā)現(xiàn)和培養(yǎng)對人類有益的細(xì)菌，對生產(chǎn)實踐具有重要的指導(dǎo)意義?；趯?shù)期的生長規(guī)律，還可以獲得縮短菌株培養(yǎng)期的方法：接種對數(shù)期的菌株，使用最佳菌齡，增加接種量等；根據(jù)穩(wěn)定期的生長規(guī)律，可以看出產(chǎn)物的最佳收獲期，以及最佳測定期。通過更深層次的研究還可促進連續(xù)培養(yǎng)原理的提出和工藝技術(shù)的搭建。下面為介紹細(xì)菌生長曲線測定的基本原理與操作步驟。
細(xì)菌生長曲線測定的基本原理：
當(dāng)將細(xì)菌接種到液體培養(yǎng)基中，每隔一段時間計算細(xì)胞數(shù)量時，就可以繪制出一個典型的細(xì)菌生長曲線，顯示細(xì)菌隨時間的生長情況。它顯示了四個不同的增長階段。
1.滯后期：由于細(xì)胞對培養(yǎng)條件的生理適應(yīng)而導(dǎo)致生長緩慢或缺乏生長，或由于初始細(xì)胞密度低而導(dǎo)致生長緩慢。
2.對數(shù)或指數(shù)階段：達(dá)到最佳增長率，在此期間，細(xì)胞數(shù)量在離散時間間隔內(nèi)成對數(shù)增長。
3.平臺期：細(xì)胞的生長（細(xì)胞分裂）和死亡相互平衡，導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)量沒有凈增加。生長速度的下降通常是由于缺乏營養(yǎng)物質(zhì)和/或有毒廢物成分的積累。
4.下降或死亡階段：死亡率超過生長速率，導(dǎo)致活細(xì)胞的凈損失。
細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞絕對生長數(shù)的常用方法，也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo)，它以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，細(xì)胞密度為縱坐標(biāo)。
濁度法可用于繪制細(xì)菌在肉湯或液體培養(yǎng)基中的生長曲線。它是用來分析生長趨勢的最簡單的方法之一，因為它使用分光光度計來跟蹤光密度（OD）隨時間的變化。換句話說，隨著樣本中細(xì)胞數(shù)量的增加，光通過樣本的傳輸就會減少。
所需材料：
細(xì)菌培養(yǎng)（大腸桿菌）、肉湯(Luria Bertani（LB）肉湯、營養(yǎng)肉湯）
玻璃器皿：圓錐形燒瓶、量筒、無菌試管、無菌培養(yǎng)皿試劑：蒸餾水
其他：培養(yǎng)箱、搖床、分光光度計、移液管、槍頭、無菌環(huán)
操作步驟：
第1天：使用無菌環(huán)，將細(xì)菌培養(yǎng)環(huán)放在瓊脂平板上。在37℃下孵育18-24小時。
第2天：從瓊脂平板中取出每個菌株的一個菌落，接種到含有10 ml高壓滅菌的肉湯培養(yǎng)基的試管中。將試管在37℃下孵育過夜。
第3天：在500 ml無菌錐形燒瓶中取250 ml高壓滅菌的肉湯培養(yǎng)基。在上述燒瓶中接種5 ml過夜培養(yǎng)的培養(yǎng)物。測定0小時的OD值。在37℃下培養(yǎng)。每隔30分鐘取1 ml培養(yǎng)懸液，用分光光度計取600 nm波長的光密度（OD），直到讀數(shù)變成靜態(tài)?；蛘撸?0分鐘取1 ml等量的培養(yǎng)懸液，加入50-100μl的甲醛。等實驗結(jié)束時測定所有等量的培養(yǎng)懸液的光密度。實驗結(jié)束時，在X軸上繪制以分鐘為單位的時間與Y軸上600nm處的光密度圖，得到細(xì)菌的生長曲線。
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